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國立清華大學 工程與系統科學系 王翔郁所指導 侯冠宇的 利用微液滴系統觀察顆粒物質對金黃色葡萄球菌生長的影響 （2020），提出swiss黃色藥關鍵因素是什麼，來自於微液滴系統、金黃色葡萄球菌、顆粒物質、多環芳香烴。

而第二篇論文國立中興大學 獸醫學系暨研究所 莊士德所指導 謝睿純的 臺灣牛乳房炎防治策略之擬定 （2019），提出因為有 乳房炎、乳牛、台灣、防治策略的重點而找出了 swiss黃色藥的解答。

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利用微液滴系統觀察顆粒物質對金黃色葡萄球菌生長的影響

為了解決swiss黃色藥的問題，作者侯冠宇 這樣論述：

人體吸入空氣中的顆粒物質進而引發疾病的同時，體內微生物族群的平衡也會因此破壞。目前沒有文獻能夠明確解釋疾病的產生是顆粒物質改變體內環境，才導致微生物族群的破壞，還是顆粒物質影響微生物的生長速度導致平衡破壞，進而引發疾病。為了確認是否顆粒物質會直接影響著微生物的生長速度，本研究的目標在於探討顆粒物質是如何影響著人體內常見的致病菌(金黃色葡萄球菌)的生長。　　本研究分別利用巨觀與微觀的培養條件，分別探討顆粒物質的水溶性成分、油溶性成分、固體顆粒、以及未經處理顆粒物質對金黃色葡萄球菌生長的影響。實驗採用的兩種顆粒物質分別為SRM-1648a (都市室外收集)與SRM-2585 (室內收集)，且16

48a和2585含有成分相似但不含量的多環芳香烴（Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，簡稱PAHs）。　　在巨觀實驗中將金黃色葡萄球菌培養於離心管內並以點盤定量細菌濃度，可得知1648a和2585的水溶性成分增加金黃色葡萄球菌的生長速度，分別是控制組的1.20倍、1.06倍，油溶性成分對生長速度的影響則不明顯，分別為控制組的0.92倍、0.96倍，可能原因為低分子量PAHs溶於水後被金黃色葡萄球菌降解形成碳源作為養分，留在油相中的高分子量PAHs因溶解於水溶液中的量極低，在離心管中與細菌接觸的機會相當低，只會發生在兩相交界面，因此沒有機會被細菌降解。另外，添加萃取

過後的「固體顆粒」(不含PAHs及其他水溶/油溶性成分)後，金黃色葡萄球菌有了易附著的媒介而更容易團聚生長，生長速度分別是控制組的1.09倍、1.13倍。添加未萃取的顆粒物質後，多了水溶/油溶性成分的影響，影響程度反而比「固體顆粒」低，生長速度分別是1.07倍、1.06倍。油溶性成分中的高分子量PAHs單獨存在時雖然不會影響金黃色葡萄球菌的生長，但是當金黃色葡萄球菌團聚於顆粒物質上，群體感應(quorem sensing)會放大高分子量PAHs的毒性，而水溶性成分中的低分子量PAHs雖然會增加金黃色葡萄球菌的生長，但是油溶性成分中的高分子量PAHs含量較高，因此毒性的影響力大於額外養分。　　微

觀實驗將金黃色葡萄球菌培養於微液滴之中，並利用DiI螢光標記細胞膜以定量細菌數。微液滴的形成利用flow-focusing微流道達成，菌液和dSURF分別作為分散相與連續相，並調整通入液體的壓力使液滴直徑控制在125um。1648a和2585的水溶性成分皆增加了液滴平均最大容忍細菌數量(κ)，分別為控制組1.44、1.40倍，原因與巨觀實驗相同，低分子量的PAHs被降解後產生額外的養分而使得液滴中可容忍的細胞數增加。兩種顆粒物質的油溶性成分也增加金黃色葡萄球菌的最大生長速度(gr_max)，分別為控制組的2.05、1.18倍，雖然高分子量的PAHs在巨觀環境下難以被降解，但是培養於液滴中，增加

了每個細菌個體與油溶性成分接觸的機會，因此加速了降解過程，使高分子量的PAHs也被降解釋放出額外養分。　　本研究利用巨觀與微觀的培養條件，證實顆粒物質的水溶性成分及固體顆粒增加了金黃色葡萄球菌生長，並揭露顆粒物質影響金黃色葡萄球菌生長的可能途徑，長時間暴露在顆粒物質環境下，有可能增加金黃色葡萄球菌的生長而破壞了體內菌叢平衡，進而引發疾病。未來希望能夠採用特定含量較高的高環數、低環數PAHs，以確立本實驗認為PAHs能夠被金黃色葡萄球菌降解並提供養分的假設。

臺灣牛乳房炎防治策略之擬定

為了解決swiss黃色藥的問題，作者謝睿純 這樣論述：

乳房炎除了會造成牛隻產乳量及生乳品質下降之外，同時也會增加廢棄乳量、醫療及人力成本，更是造成牛隻提早淘汰的原因之一。這些情形皆是全球乳業成本損失的原因之一。酪農業在臺灣發展超過60年，然而對於臺灣牛乳房炎的微生物感染情形以及現場擠乳衛生的缺失沒有較長時間的研究與探討。因此，本研究的目的為利用臺灣牛乳汁微生物培養結果及現場擠乳衛生缺失以建立臺灣牛乳房炎之防治策略。自2010至2019年間，收集臺灣15個縣市合計共104個牧場之生乳樣本進行微生物培養與診斷，並隨機挑選鏈球菌、凝固酶陰性葡萄球菌(coagulase-negative staphylococci, CNS)、大腸桿菌群及藻類進行生化

鑑定，了解臺灣盛行的種別。並對於鏈球菌、CNS、金黃色葡萄萄球菌、大腸桿菌群及革蘭氏陽性桿菌作抗生素感受性試驗；以chlorhexidine及iodine進行最小殺藻濃度試驗。於擠乳時間採集乳汁樣本的94個牧場，另紀錄其擠乳衛生缺失。在22,394個乳汁樣本中，有培養出微生物感染者44.4%，以鏈球菌(14.2%)為盛行率最高，其次依序為CNS (10.6%)、革蘭氏陽性球菌(6.7%)、革蘭氏陽性桿菌(6.0%)、大腸桿菌群(4.1%)、Prototheca spp. (1.4%)、酵母菌(0.8%)、金黃色葡萄球菌(0.3%)及其他(0.4%)。未培養出微生物者有51.0%，樣本汙染則佔4

.5%。鏈球菌、CNS及革蘭氏陽性桿菌對cephazolin及cefuroxime的感受性較高；然而鏈球菌對tetracyclines及neomycin有較高的抗性，36.8%的CNS對penicillin有具有抗性，52.4%的革蘭氏陽性桿菌對tetracycline具抗性；另外，金黃色葡萄球菌對penicillin皆具有抗性；大腸桿菌群則僅有50.3%及47.7%對ceftiofur及cefuroxime具感受性。Chlorhexidine及iodine的最小殺藻濃度分別為1.56-3.13 μg/ml及48.83-390.63 μg/ml。根據生化鑑定的結果，鏈球菌中以Streptoco

ccus uberis最為常見，CNS則是Staphylococcus chromogenes最常見，Prototheca zopfii genotype 2則是乳房炎中最常見的藻類，大腸桿菌群則主要是Escherichia coli及Klebsiella spp.。在現場可以觀察到乳頭開口角化過度的比例高，因此許多牧場可觀察到乳頭開口未清潔乾淨的情形。此外，前藥浴與乳頭的接觸時間太短、乳頭未能完全擦乾、拉乳杯及後藥浴的塗敷情形不良等皆是臺灣常見的問題。因此，改善乳頭及乳房清潔度以降低病原菌與乳頭開口接觸的機會，前藥浴與乳頭接觸30秒後再完全擦乾乳頭等的擠乳前作業，是臺灣在擠乳作業程序上必須修

正的地方，以降低環境性病原菌感染的機會。此外，教育現場擠乳人員正確的擠乳作業程序觀念，正確用藥觀念以及提倡管理者妥善紀錄乳房炎的發生，同時配合定期的乳汁微生物檢查，是降低臺灣乳房炎發生的重要防治策略。

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